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Hilo: ¿Me podéis ayudar con la preparación del siguiente Buffer?

  1. #1
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    Predeterminado ¿Me podéis ayudar con la preparación del siguiente Buffer?

    Buenas tardes,

    querría preparar 10 mL del siguiente Buffer:

    2% Tritón X-100
    1% SDS
    100 mM NaCl
    10 mM Tris-HCl, pH 8.0
    1 mM EDTA


    Tengo stock de SDS al 20%, y NaCL 5M.

    ¿Cuantos mL tengo que emplear de cada uno y cuántos gramos de EDTA?


    Muchas gracias de antemano.

  2. #2
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    Predeterminado Re: ¿Me podéis ayudar con la preparación del siguiente Buffer?

    Hola!

    veo que quieres preparar un buffer de lisis. Te comento que existen foros (en ingles los que yo conozco) especializados en biologia molecular, por lo que te pueden brindar una ayuda mas dirigida.
    Respecto a tu consulta, la preperacion de soluciones tamponadas se realiza casi exclusivamente con la formula Vi·Ci=Vf·Cf, donde V = volumen, C = concentracion, i = inicial, f = final.
    Asi, se tiene:
    -el triton x-100 es detergente liquido asi que debes usar 200uL
    -500uL de SDS al 20%
    -200uL de NaCl 5M
    -el Tris-HCl no dijiste si debias disolverlo del stock en polvo (y ajusta pH) o ya tienes una solucion stock, en cuyo caso debes usar la formula para calcular concentraciones
    -3,72mg de EDTA (pero te recomiendo masar una cantidad mayor y preparar un stock y luego diluirlo).
    -llevar a 10mL el volumen final con agua bidestilada por lo menos (dependiendo el uso que quieras darle a la solucion)

    Espero te sirva, saludos.

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